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德國(guó)NanoTemper蛋白質(zhì)穩(wěn)定性分析技術(shù)（nanoDSF）：PR.48

☆  高通量：可同時(shí)測(cè)定48個(gè)樣品
☆ 超高數(shù)據(jù)分辨率：每個(gè)樣品采集超過(guò)1000個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)
☆ 功能多樣：Tm、Ton、Tagg、Cm、△G、等溫穩(wěn)定性、變復(fù)性等
☆ 檢測(cè)濃度范圍廣：5 µg/ml 到250 mg/ml
☆ 樣品消耗量低：10 µL/樣品
☆ 檢測(cè)不受限制：無(wú)需染料，可在任何類(lèi)型緩沖液中測(cè)定
☆ 運(yùn)行成本低：耗材價(jià)格低、無(wú)維護(hù)費(fèi)、非常簡(jiǎn)單易操作

Prometheus NT.Plex主要參數(shù)：

1. 具有多個(gè)檢測(cè)模塊：雙紫外(Dual-UV, 330/350nm)檢測(cè)模塊和背向反射光（Backreflection optics）檢測(cè)模塊；
2. 直接檢測(cè)蛋白質(zhì)內(nèi)源熒光，測(cè)定時(shí)無(wú)需添加染料，不受緩沖液條件限制；
3. 測(cè)定參數(shù)：T_m、T_on、C_m、ΔG、T_agg；
4. 可用于研究蛋白質(zhì)等溫穩(wěn)定性和變溫穩(wěn)定性；
5. 可測(cè)定蛋白樣品中變性成分的比例，用于質(zhì)量控制；
6. 檢測(cè)通量：每次24個(gè)樣品；
7. 樣品體積：10 μL/樣品；
8. 樣品濃度范圍：5 μg/mL - 250 mg/mL;
9. 上樣方式：機(jī)械臂自動(dòng)上樣；
10. 溫控范圍：15-110℃，升溫速度：0.1-7℃/分鐘；
11. 數(shù)據(jù)采樣率：每個(gè)樣品每分鐘≥20個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)；
12. 儀器無(wú)需定期更換配件，實(shí)驗(yàn)完成后無(wú)需對(duì)儀器進(jìn)行清洗維護(hù)

檢測(cè)原理：

nanoDSF是一種先進(jìn)的差示掃描熒光技術(shù)，具有超高分辨率，利用蛋白中色氨酸和酪氨酸自發(fā)熒光檢測(cè)其穩(wěn)定性。它廣泛應(yīng)用于抗體工程、膜蛋白研究、制劑和質(zhì)量控制等領(lǐng)域。蛋白中色氨酸和酪氨酸熒光受其所在微環(huán)境的影響很大，尤其是色氨酸熒光，蛋白結(jié)構(gòu)的變化通常會(huì)影響其強(qiáng)度和發(fā)射波長(zhǎng)。Prometheus 儀器配備的熒光檢測(cè)器可測(cè)定樣品在兩種波長(zhǎng)（350 nm 和 330 nm）下的熒光強(qiáng)度，因而可以靈敏的檢測(cè)到蛋白去折疊過(guò)程中熒光強(qiáng)度和熒光峰值的變化。通過(guò)變性曲線(xiàn)可以得到蛋白穩(wěn)定性的重要參數(shù)。衡量目標(biāo)蛋白的熱穩(wěn)定性可通過(guò)參數(shù)熔融溫度（Tm），即一半蛋白去折疊時(shí)的溫度。